如何選擇HPLC層析管柱(How to choose HPLC Column) - YMC ...
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粒徑(分析級使用<2μm~10μm,純化使用5μm~>50μm):粒徑越小分離效果越好但壓力也會越高■ 孔徑(nm ... Reversed-phase 逆相層析, YMC-Triart C18 管柱
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YMCTaiwanCo.,Ltd.技術資料如何選擇HPLC層析管柱(HowtochooseHPLCColumn)
進行HPLC系統操作時,操作人員常常會面臨管柱(Column)選擇之困擾。
樣品種類、分離目的延伸出各種材質、規格之層析管柱,以下我們以四種判斷方式來進行說明:分離模式、管柱規格、樣品特性、分離目的。
分離模式(SeparationModes)
Ionexchange
離子交換
Sizeexclusion
分子篩層析
Hydrophobicinteraction
疏水層析
ReversedPhase
逆相層析
Principleof
Separation
Electriccharge
Molecularweight
Hydrophobicity
Hydrophobicity
Molecular
weightrange
Uptoseveralmillions
Uptoabout1,000,000
Uptoseveralmillions
Uptoabout150,000
Resolution
+++
++
+++
+++
Speed
++~+++
+
+++
+++
Loading
+++
++
+++
++
Sample
Stability
+++
+++
+++
+~++
Typical
applications
Chargevariantsanalysis
Separationofaggregates
Separationoffragments
Drug-to-antibodyratioanalysis
ofantibody-drugconjugates
Peptidemapping
LC/MS
Structuralanalysis
管柱規格
管柱的基本性質可分為
■膠體結構:矽膠(YMC採用柱效高之球型材質)、聚合物
■表面修飾官能基:常見材質有C18,phenyl,NH2…等,更多官能基材質選擇請參考這裡
■粒徑(分析級使用<2μm~10μm,純化使用5μm~>50μm):粒徑越小分離效果越好但壓力也會越高
■孔徑(nm或Å):依照分子大小選擇(大致上分子量<1~3萬之分子可選用8-12nm(80-120Å)之孔徑,孔徑大小選擇也會影響到比表面積
■管柱內徑:依樣品負荷量選擇,UHPLC常用2.0或2.1mm,HPLC常用4.6mm內徑。
YMC可提供:
–NanoLCColumn:75μmID~500μmID
–UHPLCColumn:2.0~3.0mmID
–HPLCColumn:2.0~8.0mmID
–PrepLCColumn:10-1000mmID
(除上述之規格需求,請與我們聯繫諮詢[email protected])
樣品特性
小分子有機化合物分離
Pharmaceuticalproducts藥品
Agriculturalchemicals農藥
Foodadditives食品添加劑
Naturalproducts天然物
Others其他
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Vitamins維他命
Reversed-phase逆相層析
Water-solublevitamins
水溶性維他命
YMC-TriartC18管柱
Fat-solublevitamins
脂溶性維他命
YMC-TriartC18管柱
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Carotenoid管柱
HILIC 親水性層析
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TriartDiol-HILIC管柱
Normal-phase正相層析
Fat-solublevitamins
脂溶性維他命
PackSIL,SIL-06管柱
PolyamineII管柱
Organicacids有機酸
Fattyacids脂肪酸
Reversed-phase逆相層析
YMC-TriartC18管柱
Normal-phase正相層析
PackSIL,SIL-06管柱
Phospholipids磷脂質
Reversed-phase逆相層析
YMC-TriartC18管柱
Normal-phase正相層析
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Aminoacids胺基酸
HILIC 親水性層析
Freeaminoacids
游離胺基酸
TriartDiol-HILIC管柱
Reversed-phase逆相層析
Freeaminoacids
游離胺基酸
Labeledaminoacids
標記胺基酸
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分離目的
除分析樣品外,有時會需要使用製備級管柱進行樣品之純化,然而純化放大不僅僅是換支大內徑的管柱就好,對於分離度、收率以及成本的考量都是無法在分析級管柱就估算得出來的。
YMC是少數除提供LC分析級管柱外還能提供大量純化系統、管柱、膠體之供應商。
對於客戶來說,不需要在面臨放大需求時而重新測試分析級的條件,並可供應從實驗室級~試量產一路放大至大規模生產。
以下表格為進行放大純化時的考量方向:
關於純化系統、管柱之選擇請參考這裡。
關於純化膠體之選擇請參考這裡。
如上述內容無法解決您實驗上的問題,歡迎來電/信與我們討論。
ymc
2020-10-29
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